1. 荧光定量PCR仪(BIO-RAD Opus 96）

2.仪器简介

CFX Opus 96 PCR仪,伯乐最新款荧光定量PCR仪，具有专利的轻量化样品槽模块，更优异的温控均一性，最大程度的减少边缘效应。动态温度梯度功能，可高效、快速优化反应体系。光学系统逐一激发和检测每个反应孔的荧光信号，不仅具有更高的灵敏度，还能避免反应间的荧光交叉干扰，同时消除光程差，无需荧光校正。自动收集反应模块上所有反应孔的荧光信号，不必担心因编辑错误而丢失数据。配备荧光共振能量转移（FRET）实验的通道，可扩展实验选择。具有强大的软件分析系统，可实现自动化统计学分析—轻松实现包括t-检验、方差分析在内的统计学分析。创建和导出可发表的图表—图表可注释p值，使用文本和箭头标识特定数据；可更改颜色，字体和图例；导出任何大小和分辨率的图形以用于演示或出版。轻松整合PrimePCR Assays—利用预设计和验证的PrimePCR引物和反应板可以节省时间。更灵活多样的连接方式，实现云台数据传输。

3.岗前培训文字内容：原理、使用方法、用途，安全注意事项等

Bio-Rad CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪操作说明

CFX Maestro软件操作说明

1、 连接电源，打开仪器后方开关，等待仪器初始化。

2、 打开电脑，打开CFX Maestro 软件，等待软件与仪器连接。

3、 点击“User-defined”进入用户自定义编辑界面。

4、 在弹出的“Run Setup”对话框中进行“Protocol”、“Plate” 设置。

5、 在“Protocol”编辑界面，点击“Create New”新建程序。进入Protocol编辑界面。蓝色突出显示当前选定步骤。

6、 在Protocol编辑界面上方第二列，在“Insert Step”之后选择“After/Before”，即设置在当前步骤之后/之前插入新的步骤。在“Sample Volume”之后输入样品体积。

7、 点击对应步骤的温度或时间进行更改，也可在下方列表中对应步骤中更改。

8、 在Protocol编辑界面左侧，点击“Insert Step”插入步骤，点击“Insert Gradient”插入温度梯度步骤，点击“Insert GOTO”插入循环步骤，点击“Insert Melt Curve”插入溶解曲线，点击“Add Plate Read to Step”设置在当前步骤检测荧光信号，点击“Step Options”进行当前步骤设置（温度、时间、升降温速率），点击“Delete Step”删除当前选定步骤。

9、 设置好扩增程序，点击“OK”进行保存，并退出编辑界面，返回“Run Setup”界面。

10、 点击“Next”进入“Plate”设置界面。点击“Create New”进入Plate编辑界面。

11、 在Plate编辑界面菜单栏，点击“Settings” à“Plate Type”设置板类型：白板“BR White”和透明板“BR Clear”。

12、 在Plate编辑界面菜单栏下方中央处，“Scan Mode”选择检测通道：“SYBR/FAM only”为染料法检测通道，“All Channels”为多重荧光通道。

13、 在Plate编辑界面右侧，从上到下依次选择和设置：通道选择“Select Fluorophores”，样品类型“Sample Type”，靶基因名称“Target Names”，样品名称“Sample Names”，生物学重复“Biological Group”，技术学重复“Technical Replicates”，实验设置“Experiment Settings”，清除选定样品孔的重复设置“Clear Replicate #”，清空选定孔的设置“Clear Wells”。

14、 实验设置“Experiment Settings”选项中进行内参基因（“Targets”à“Reference”）和对照组（“Samples and Biological Groups” à“Control”）的设置，点击“OK”保存设置。

15、 Plate编辑完成后，点击“OK”保存设置，返回“Run Setup”界面。

16、 点击“Next”进入“Start Run”界面，点击“Open Lid”打开仪器盖子，放入低位96孔板或8联管。

17、 点击“Close Lid”关盖。

18、 点击“Start Run”开始运行。可在当前界面进行切换以查看反应程序、扩增曲线、剩余时间。

19、 程序运行结束后，打开盖子取出96孔板或8联管。分析和导出数据。

20、 关机程序：先关闭软件、然后在仪器触摸屏右下方点击“Shut down”，最后关闭电源开关。

使用注意事项及日常维护

1、请使用低位“low profile”耗材进行实验，避免使用高位耗材损坏仪器！

2、注意开关机顺序，先打开仪器再打开软件；关机时先关闭软件，触摸屏点击Shut Down，最后关闭仪器后方开关。

3、如果仪器需要搬运，请联系硬件工程师。